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    全自動固相萃取儀萃取分為哪幾步?

    發布于 2015/10/12閱讀(2853)來源 本昂儀器

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    全自動固相萃取儀萃取分為哪幾步?

    固相萃取過程要求樣品以溶液形式存在,沒有干擾,而且有足夠的濃度以被檢測。固相萃取的發展過程分為五步:
    第一步 選擇萃取管
    1.正相柱、反相柱、吸附柱:樣品質量不超過填料質量的 5%。
    2.LC-SAX 和 LC-SCX 柱:其吸附劑容量為 0.2 毫當量/克 (1 毫當量=1 毫摩爾的[+1]或[-1]帶電荷物質)。
    3.LC-NH2 和 LC-WCX 柱:離子交換容量由應用決定。
    第二步 預處理萃取管
    反相類型硅膠和非極性吸附劑介質,通常用水溶性有機溶劑,如 甲醇,預處理。甲醇濕潤吸附劑表面和滲透鍵合烷基相,以允許更有 效地潤濕硅膠表面。這些溶劑通常與洗脫劑一樣是用于消除固相萃取 管上的雜質對分析物的干擾, 正相類型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質通常用樣品所在的有機 溶劑來預處理。 離子交換填料:對于非極性有機溶劑中的樣品,用樣品溶劑來預處 理。對極性溶劑中的樣品,用水溶性有機溶劑來預處理。為了使固相 萃取填料從預處理到樣品加入時都保持潤濕,允許大約 1ml 的預處理 溶劑在管過濾片上。

    第三步加入樣品
    當過量體積的水溶液被萃取時,反相硅膠填料漸漸減少預處理時所 獲得的溶劑化層。這就會降低萃取效率和樣品的回收率。如果回收率較 低或重現性不好,可能是分析物流失H、鹽的濃度和樣品溶液在有機相中的含量。為了避免堵塞固相萃取管 的過濾片,如果可能,在萃取之前預先過濾或離心樣品。 流速會影響某些化臺物的保留。一般來說,對于離子交換固相萃取 管,流速小應大于 2ml/min;對于其它上的固相萃取管,流速不應大于5ml/min;如果時間不是一個確定因素的話,滴速最佳。


    第四步沖洗填料
    若分析物被保留在填料上,用一種不能洗脫所要化合物的溶液,去沖 洗掉不要的物質。沖洗液不超過一個管體積。 為消除不要的、可能保留很弱的物質,用比樣品基質強,但其強度又 不至于洗脫分析物的的溶劑去沖洗填料。典型的溶液可含有比最后洗 液少一點的有機或無機鹽,也可以調節不同的 pH。與最后洗脫液完全 不同極性的純溶劑或溶劑混合物可為有用的洗脫液。 如果選用分析物不被保留在填料上的方案,則應用相當于一管體積的樣品 溶劑去洗脫管上的分析物。在這種情況下,沖洗是作為洗脫來完成萃取過程。

    第五步 洗脫感興趣的化合物
    用少量能洗脫分析物的溶液去沖洗填料(一般 2ml-200 ml,取決于管的 大小)用兩次少量液體洗脫分析物比用一次大體積更有效,當洗脫液停留在填 料上為 20 秒到 1 分鐘時,分析物的回收率最好。這一步滴速是最有利的。 對于反相、正相和離子交換過程,一般五步全都需要進行; 對于樣品凈化過程,只需要前三步,并且在第三步,分析物將隨著樣品從 管內流出而收集,干擾雜質保留在吸附劑上。

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